ឹម
អ្នកវិភាគខ្សែសង្វាក់របស់ខ្សែសង្វាក់ Polymerase (PCR) គឺជាឧបករណ៍សំខាន់ក្នុងជីវវិទ្យាម៉ូលេគុលដែលអនុញ្ញាតឱ្យអ្នកស្រាវជ្រាវពង្រីកឌីអិនអេសម្រាប់កម្មវិធីដែលមានចាប់ពីការស្រាវជ្រាវហ្សែនរហូតដល់ការស្រាវជ្រាវទិចក្នុងការធ្វើរោគវិនិច្ឆ័យរោគ។ ទោះយ៉ាងណាក៏ដោយដូចជាឧបករណ៍ស្មុគស្មាញណាមួយអ្នកវិភាគ PCR មួយអាចជួបប្រទះបញ្ហាដែលប៉ះពាល់ដល់ការអនុវត្តរបស់វា។ អត្ថបទនេះនិយាយអំពីសំណួរទូទៅមួយចំនួនអំពីកម្មវិធីវិភាគ PCRCការដោះស្រាយបញ្ហានិងផ្តល់នូវដំណោះស្រាយជាក់ស្តែងចំពោះបញ្ហាទូទៅ។
1 ។ ហេតុអ្វីប្រតិកម្ម PCR របស់ខ្ញុំមិនមានអន្ទាត?
បញ្ហាទូទៅបំផុតមួយដែលអ្នកប្រើប្រាស់ប្រឈមមុខគឺអសមត្ថភាពរបស់ PCR ប្រតិកម្មដើម្បីពង្រីកឌីអិនអេគោលដៅ។ នេះអាចត្រូវបានសន្មតថាមានកត្តាជាច្រើន:
ការរចនាបៀរដែលមិនត្រឹមត្រូវ: ត្រូវប្រាកដថាអ្នកបឋមរបស់អ្នកជាក់លាក់សម្រាប់លំដាប់គោលដៅហើយមានសីតុណ្ហភាពរលាយល្អបំផុត (TM) ។ ប្រើឧបករណ៍សូហ្វវែរសម្រាប់ការរចនាបឋមដើម្បីជៀសវាងការចងខ្សែមិនសមរម្យ។
គំរូមិនគ្រប់គ្រាន់ឌីអិនអេ: ផ្ទៀងផ្ទាត់ថាអ្នកកំពុងប្រើចំនួនឌីអិនអេដែលមានចំនួនគ្រប់គ្រាន់នៃគំរូឌីអិនអេ។ តិចពេកនឹងបណ្តាលឱ្យខ្សោយឬមិនអំភ្លី។
Inhibitors ក្នុងគំរូ: ការចម្លងរោគក្នុងគំរូអាចរារាំងប្រតិកម្ម PCR ។ ពិចារណាបន្សំឌីអិនអេរបស់អ្នកឬប្រើវិធីសាស្ត្រទាញយកខុសៗគ្នា។
ដំណោះស្រាយ: ពិនិត្យមើលការរចនាបៀររបស់អ្នកបង្កើនការផ្តោតអារម្មណ៍គំរូនិងត្រូវប្រាកដថាគំរូរបស់អ្នកមិនមានផ្ទុកថ្នាំ inibitors ។
2 ។ ហេតុអ្វីបានជាផលិតផល PC របស់ខ្ញុំមានទំហំខុស?
ប្រសិនបើទំហំផលិតផល PC របស់អ្នកមិនដូចការរំពឹងទុកទេវាអាចបង្ហាញពីបញ្ហាជាមួយនឹងលក្ខខណ្ឌប្រតិកម្មឬគ្រឿងផ្សំដែលបានប្រើ។
ទំហំពង្រីកមិនជាក់លាក់: នេះអាចកើតឡើងប្រសិនបើការបឋមភ្ជាប់ទៅនឹងគេហទំព័រដែលមិនសមហេតុផល។ ពិនិត្យមើលភាពជាក់លាក់របស់អ្នកបឋមដោយប្រើឧបករណ៍ដូចជាការផ្ទុះ។
សីតុណ្ហាភាពអាណ្ណនាមិនត្រឹមត្រូវ: ប្រសិនបើសីតុណ្ហភាពអាណ្ណះទាបពេកការចងភ្ជាប់មិនជាក់លាក់អាចបណ្តាលឱ្យមានលទ្ធផល។ ការបង្កើនប្រសិទ្ធិភាពនៃសីតុណ្ហាភាព Annealing ដោយជម្រាល pcr ។
ដំណោះស្រាយ: បញ្ជាក់ពីភាពជាក់លាក់របស់ Primer និងបង្កើនប្រសិទ្ធភាពសីតុណ្ហភាពរបស់ Annealing ដើម្បីធ្វើឱ្យប្រសើរឡើងនូវភាពត្រឹមត្រូវនៃផលិតផល PCR ។
3 ។ អ្នកវិភាគរបស់ខ្ញុំបង្ហាញសារកំហុស។ តើខ្ញុំគួរធ្វើអ្វី?
សារកំហុសនៅលើអ្នកវិភាគ PCRC អាចជាការគួរឱ្យព្រួយបារម្ភប៉ុន្តែពួកគេច្រើនតែផ្តល់នូវតម្រុយដល់បញ្ហាដែលមានសក្តានុពល។
បញ្ហាក្រិតតាមខ្នាត: ត្រូវប្រាកដថាអ្នកវិភាគ PCR ត្រូវបានក្រិតតាមខ្នាតឱ្យបានត្រឹមត្រូវ។ ការថែទាំការថែរក្សានិងការក្រិតខ្នាតជាទៀងទាត់មានសារៈសំខាន់ណាស់ក្នុងការទទួលបានលទ្ធផលត្រឹមត្រូវ។
ក្រុមសូហ្វវែរ: ពេលខ្លះកំហុសផ្នែកទន់អាចបង្កបញ្ហា។ ចាប់ផ្ដើមកុំព្យូទ័ររបស់អ្នកឡើងវិញហើយពិនិត្យមើលបច្ចុប្បន្នភាពកម្មវិធី។
ដំណោះស្រាយ: យោងតាមសៀវភៅណែនាំអ្នកប្រើសម្រាប់លេខកូដកំហុសជាក់លាក់ហើយធ្វើតាមជំហានដោះស្រាយបញ្ហាដែលបានណែនាំ។ ការថែទាំជាប្រចាំអាចការពារបញ្ហាជាច្រើន។
4 ។ ហេតុអ្វីលទ្ធផលប្រតិកម្ម PCR មិនស៊ីចង្វាក់គ្នា?
លទ្ធផល PCR ដែលមិនស៊ីចង្វាក់គ្នាអាចធ្វើឱ្យមានការខកចិត្តសម្រាប់ហេតុផលជាច្រើន:
គុណភាព reagent: ធានាថារាល់ការ reargents រួមទាំងអង់ស៊ីម, សតិនិង DNTPs, គឺស្រស់និងមានគុណភាពខ្ពស់។ ការផុតកំណត់ដែលផុតកំណត់ឬកខ្វក់អាចបណ្តាលឱ្យមានភាពប្រែប្រួល។
ការក្រិតខ្នាត Tyermal: ការកំណត់សីតុណ្ហភាពមិនស៊ីចង្វាក់អាចប៉ះពាល់ដល់ដំណើរការ PCR ។ ពិនិត្យមើលការក្រិតខ្នាតទៀងទាត់នៃការវះកាត់វដ្តកម្ដៅ។
ដំណោះស្រាយ: ប្រើសារធាតុដែលមានគុណភាពខ្ពស់ហើយក្រិតតាមខ្នាតមើមដំឡានរបស់អ្នកឱ្យបានទៀងទាត់ដើម្បីធានាបាននូវលទ្ធផលជាប់លាប់។
5 ។ តើធ្វើដូចម្តេចដើម្បីកែលម្អប្រសិទ្ធភាពប្រតិកម្ម PCR?
ការកែលម្អប្រសិទ្ធភាពនៃប្រតិកម្ម PCR ដែលអាចនាំឱ្យមានទិន្នផលខ្ពស់និងលទ្ធផលដែលគួរឱ្យទុកចិត្តកាន់តែច្រើន។
បង្កើនប្រសិទ្ធភាពលក្ខខណ្ឌប្រតិកម្ម: ការពិសោធន៍ដោយប្រើការប្រមូលផ្តុំមភ្នែកផ្សេងៗគ្នានៃគំរូឌីអិនអេនិង MGCL2 ។ ប្រតិកម្ម PCR នីមួយៗអាចត្រូវការលក្ខខណ្ឌពិសេសសម្រាប់ដំណើរការល្អប្រសើរបំផុត។
ប្រើអង់ស៊ីមដែលមានភាពស្មោះត្រង់ខ្ពស់: ប្រសិនបើភាពត្រឹមត្រូវមានសារៈសំខាន់សូមពិចារណាប្រើវត្ថុធាតុ polymerate dna ដែលមានភាពស្មោះត្រង់ខ្ពស់ដើម្បីកាត់បន្ថយកំហុសអប្បបរមាក្នុងកំឡុងពេលពង្រីក។
ដំណោះស្រាយ: អនុវត្តការពិសោធន៍ដែលមានប្រសិទ្ធិភាពក្នុងការស្វែងរកលក្ខខណ្ឌល្អបំផុតសម្រាប់ការរៀបចំ PCR ជាក់លាក់របស់អ្នក។
សរុបសេចក្ដីមក
ដោះស្រាយបញ្ហាកកម្មវិធីវិភាគ PCRCអាចជាភារកិច្ចដ៏គួរឱ្យខ្លាចប៉ុន្តែការយល់ដឹងអំពីបញ្ហាទូទៅហើយដំណោះស្រាយរបស់ពួកគេអាចជួយបង្កើនបទពិសោធន៍ PCR របស់អ្នកយ៉ាងខ្លាំង។ ដោយដោះស្រាយបញ្ហាទូទៅទាំងនេះអ្នកស្រាវជ្រាវអាចធ្វើឱ្យលទ្ធផល PCR ប្រសើរឡើងនិងធានាបាននូវលទ្ធផលដែលអាចទុកចិត្តបានក្នុងកម្មវិធីជីវវិទ្យាម៉ូលេគុល។ ការថែទាំទៀងទាត់ការជ្រើសរើសការប្រណាំងយ៉ាងប្រុងប្រយ័ត្ននិងការបង្កើនប្រសិទ្ធិភាពនៃលក្ខខណ្ឌប្រតិកម្មគឺជាគន្លឹះក្នុងការវិភាគដែលទទួលបានជោគជ័យ។
ពេលវេលាក្រោយ: ថ្ងៃទី 11-2024
ការកំណត់ភាពឯកជន